Natural infection with Trypanosoma cruzi in bats captured in Campeche and Yucatán, México / Infección natural con Trypanosoma cruzi en murciélagos capturados en Campeche y Yucatán, México

Abstract | Introduction: Bats have been reported as hosts of the Trypanosoma cruzi protozoan, the etiologic agent of American trypanosomiasis, an endemic zoonotic disease in México. Objective: To describe T. cruzi infection in bats from the states of Campeche and Yucatán, México. Materials and methods: Captures were made from March to November, 2017 at three sites in Yucatán and one in Campeche. Up to four mist nets on two consecutive nights were used for the capture. The bats' species were identified and euthanasia was performed to collect kidney and heart samples for total DNA extraction. Trypanosoma cruzi infection was detected by conventional PCR with the amplification of a fragment belonging to the T. cruzi DNA nuclear. Results: Eighty-six bats belonging to five families (Vespertilionidae, Noctilionidae, Mormoopidae, Phyllostomidae, and Molossidae) and 13 species (Rhogeessa aeneus, Noctilio leporinus, Pteronotus davyi, P. parnellii, Artibeus jamaicensis, A. lituratus, A. phaeotis, Glossophaga soricina, Carollia sowelli, Chiroderma villosum, Uroderma bilobatum, Sturnira parvidens, and Molossus rufus) were captured. Infection frequency by PCR was 30,2% (26/86) detected only in the renal tissue. The infected species were P. parnellii, G. soricina, A. lituratus, A. jamaicensis, S. parvidens, C. villosum, and R. aeneus. Conclusions: Our results confirmed the participation of several bat species as hosts in the T. cruzi transmission cycle in the region. Further studies are necessary to establish the importance of these animals in the zoonotic transmission of T. cruzi.

Resumen | Introducción. Los murciélagos se han reportado como huéspedes del protozoario Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la tripanosomiasis americana, enfermedad zoonótica endémica en México. Objetivo. Describir la infección con T. cruzi en murciélagos capturados en los estados de Campeche y Yucatán, México. Materiales y métodos. Se realizaron capturas de marzo a noviembre de 2017 en tres sitios de Yucatán y uno de Campeche. Para la captura se emplearon hasta cuatro redes de niebla por dos noches consecutivas. Se identificó la especie de los murciélagos capturados y se les practicó la eutanasia para recolectar muestras de riñón y corazón, utilizadas posteriormente en la extracción de ADN total. La infección con T. cruzi se detectó por la amplificación con PCR convencional de un fragmento perteneciente al ADN nuclear de T. cruzi. Resultados. Se capturaron 86 murciélagos pertenecientes a cinco familias (Vespertilionidae, Noctilionidae, Mormoopidae, Phyllostomidae, Molossidae) y 13 especies (Rhogeessa aeneus, Noctilio leporinus, Pteronotus davyi, P. parnellii, Artibeus jamaicensis, A. lituratus, A. phaeotis, Glossophaga soricina, Carollia sowelli, Chiroderma villosum, Uroderma bilobatum, Sturnira parvidens y Molossus rufus). La PCR mostró una frecuencia de infección de 30,2 % (26/86), detectada únicamente en tejido renal. Las especies infectadas fueron P. parnellii, G. soricina, A. lituratus, A. jamaicensis, S. parvidens, C. villosum y R. aeneus. Conclusiones. Los resultados confirmaron la participación de varias especies de murciélagos como huéspedes en el ciclo de transmisión de T. cruzi en la región. Es necesario realizar más estudios para determinar la importancia de estos animales en la transmisión zoonótica de T. cruzi.

Leptospira patógena en murciélagos de Campeche y Yucatán, México / Pathogenic Leptospira in bats from Campeche and Yucatán, Mexico

RESUMEN Objetivo. Reportar la infección con Leptospira en ríñones de murciélagos de Campeche y Yucatán, México, a través de la amplificación por PCR de dos fragmentos distintos del gen 16S RNA ribosomal. Materiales y métodos. Se realizaron capturas en un sitio de Campeche y dos de Yucatán. A los murciélagos capturados se les aplicó la eutanasia y se les realizó una necropsia para recolectar tejido renal que se usó en la extracción de ADN total. Se realizaron dos PCR convencionales para la amplificación de los fragmentos de 16S RNA ribosomal. Se obtuvieron las secuencias de algunos productos positivos y se analizaron con herramientas bioinformáticas para identificar la especie infectante de Leptospira. Resultados. Se capturaron 69 murciélagos pertenecientes a cuatro familias y a ocho especies distintas. La familia con mayor diversidad fue Phyllostomidae con cinco especies. La especie con mayor frecuencia de captura fue Artibeusjamaicensis (41, 59.4%). Las PCR arrojaron una frecuencia global de infección de 21.7%. Las especies infectadas fueron A. jamaicensis, Pteronotus parnellii y Chiroderma villosum. El análisis bioinformático arrojó un 99.0% de identidad para Leptospira noguchii, Leptospira borgpetersenii y Leptospira santarosai. Conclusiones. Algunas especies de murciélagos de Yucatán y Campeche son portadores renales de leptospiras patógenas, por lo que podrían participar en el ciclo silvestre de transmisión en la región. La frecuencia de infección encontrada en los riñones de los murciélagos utilizados es mayor en comparación con aquellas obtenidas en otros reservorios de Yucatán y Campeche. Nuevas especies de murciélagos son reportadas como portadores de Leptospira para México.

ABSTRACT Objective. To report the infection with Leptospira in the kidneys of bats from Campeche and Yucatán, Mexico, through the amplification by PCR of two different 16S RNA ribosomal gene fragments. Materials and methods. Bat captures were carried out at one site in Campeche and two sites in Yucatán. Euthanasia was applied to the captured bats and a necropsy was performed to collect a renal tissue sample that was used in the total DNA extraction. Two different conventional PCR were performed for the amplification of the 16S RNA ribosomal gene fragments. Some sequences from positive products were obtained and analyzed with bioinformatics tools to identify the infectious species of Leptospira. Results. Sixty-nine bats belonging to four families and eight different species were captured. The family with the greatest diversity was Phyllostomidae with five species. The most captured species was Artibeus jamaicensis (41, 59.4%). Both PCR showed a global infection frequency of 21.7%. The infected species were A. jamaicensis, Pteronotus parnellii, and Chiroderma villosum. The bioinformatic analysis of the positive products yielded a 99.0% identity for Leptospira noguchii, Leptospira borgpetersenii, and Leptospira santarosai. Conclusions. Some bat species of Yucatán and Campeche, Mexico, are renal carriers of pathogenic Leptospira, therefore participating in the transmission cycle in the region. The frequency of infection found in the renal tissue of the captured bats is higher than the one obtained from other reservoirs captured in Yucatán and Campeche. New species of bats are reported as renal Leptospira carriers in Mexico.

Estudio histopatológico de tejido cardiaco de roedores infectados con Trypanosoma cruzi capturados en barrios suburbanos de Mérida, México / Histopathological study in cardiac tissue of rodents infected with Trypanosoma cruzi, captured in suburbs of Mérida, México

Resumen Introducción. Trypanosoma cruzi es el agente causal de la tripanosomiasis americana, enfermedad endémica en México. Los roedores Mus musculus y Rattus rattus son reservorios del parásito, el cual invade las fibras cardiacas y desarrolla nidos parasitarios produciendo diversas lesiones. Los estudios histopatológicos en roedores naturalmente infectados son escasos. Objetivo. Describir los tipos y las frecuencias de las lesiones microscópicas en muestras de tejido cardiaco de M. musculus y R. rattus infectados con T. cruzi capturados en Mérida, México. Materiales y métodos. Los roedores se capturaron en los barrios suburbanos de Mérida. Se extrajo el tejido cardiaco y se procesó por la técnica de inclusión en parafina y tinción con hematoxilina y eosina. Su examen se hizo con un microscópico convencional y se determinaron todas las lesiones y su grado de afección. Resultados. Se trabajaron ocho muestras de tejido de M. musculus y siete de R. rattus. Se encontraron nidos parasitarios en siete del total de las muestras: en 3 de las 8 de M. musculus y en 4 de las 7 de R. rattus. Se observaron infiltrados inflamatorios en todas las muestras. Otras lesiones fueron la degeneración de las fibras cardiacas (8/15), la congestión de los vasos sanguíneos (6/15) y la necrosis (5/15). Discusión. Las lesiones observadas están descritas en los modelos animales experimentales y en los humanos con tripanosomiasis americana. Los infiltrados inflamatorios se han descrito como la lesión más significativa en los humanos y en los reservorios en la etapa crónica de la enfermedad. Conclusión. Las lesiones observadas están asociadas con la infección con T. cruzi, lo cual confirma que los roedores estudiados son reservorios de este parásito.

Abstract Introduction: Trypanosoma cruzi is the causal agent of the American trypanosomiasis, an endemic disease in México. The commensal rodents Mus musculus and Rattus rattus are reservoirs of this parasite, which invades cardiac fibers and develops parasite nests causing various lesions. Histopathological studies in naturally infected rodents are scarce. Objective: To describe the types and frequencies of microscopic lesions in cardiac tissue of M. musculus and R. rattus infected with T. cruzi captured in Mérida, México. Materials and methods: The rodents were captured in suburban environments of Mérida. Cardiac tissue was extracted and processed by the paraffin inclusion technique and hematoxylin and eosin stained. The observation was made with a conventional microscope and all the lesions, as well as their degree, were identified. Results: Eight tissue samples of M. musculus and seven of R. rattus were studied. Parasite nests were found in 7/15, specifically 3/8 in M. musculus and 4/7 in R. rattus. The inflammatory infiltrate was the most frequent lesion. Other lesions were: Degeneration of cardiac fibers (8/15), congestion of blood vessels (6/15), and necrosis (5/15). Discussion: The lesions we observed have been described in experimental animal models and in humans with American trypanosomiasis. The inflammatory infiltrate has been identified as the most significant lesion in humans and reservoirs in the chronic stage of the disease. Conclusion: The lesions we described are associated with T. cruzi infection, which confirms that the rodents studied are reservoirs of this parasite.

Infección con Toxoplasma gondii (Eucoccidiorida: Sarcocystidae) en murciélagos de Campeche y Yucatán, México

Toxoplasma gondii es un protozoario parásito reconocido como el agente causal de la toxoplasmosis, enfermedad zoonótica que afecta a humanos y animales domésticos o silvestres. En México, representa un problema de salud pública y veterinaria, sobre todo en regiones con climas tropicales y subtropicales. Los murciélagos han sido identificados como hospederos accidentales en el ciclo de transmisión; no obstante, en México no existe información previa; por lo tanto, el objetivo del presente estudio es reportar la infección con T. gondii en murciélagos capturados en sitios de los estados de Campeche y Yucatán, México. Se capturaron murciélagos en dos sitios de Yucatán y uno de Campeche, ubicados en la Península de Yucatán. Se recolectaron riñones, bazo e hígado y se emplearon en la extracción de ADN total. La infección con T. gondii se detectó a través de la amplificación de un fragmento del gen B1, utilizando PCR anidada. Los productos positivos fueron purificados y enviados a secuenciación para su posterior análisis de alineamiento; adicionalmente, se construyó un árbol filogenético. Se analizaron un total de 69 murciélagos pertenecientes a ocho especies distintas: 41 (59.4 %, 41/69) Artibeus jamaicensis; seis (8.7 %, 6/69) Pteronotus parnellii; seis (8.7 %, 6/69) Noctilio leporinus; seis (8.7 %, 6/69) Chiroderma villosum; cuatro (5.8 %, 4/69) Glossophaga soricina; dos (2.9 %, 2/69) Carollia sowelli; dos (2.89 %, 2/69) Artibeus lituratus y dos (2.9%, 2/69) Rhogeessa aeneus. La PCR anidada identificó ocho (11.6 %, 8/69) murciélagos positivos a la infección: seis (75 %, 6/8) A. jamaicensis, capturados en X'matkuil y Panabá, un (12.5 %, 1/8) G. soricina y un (12.5 %, 1/8) C. villosum, ambos capturados en Panabá. El análisis de alineamiento arrojó 99-100 % para cobertura y 97-99 % para identidad respecto a secuencias de T. gondii. Nuestros resultados aportan al entendimiento del ciclo de transmisión de T. gondii en la región; sin embargo, son necesarias investigaciones futuras para determinar los genotipos circulantes, ya que estudios anteriores han demostrado que estos animales pueden estar infectados con genotipos identificados en otros animales domésticos o silvestres e incluso en humanos.

Toxoplasma gondii is a protozoan parasite recognized as the causative agent of toxoplasmosis, a zoonotic disease that affects humans and domestic or wild animals. In Mexico, it represents a public and animal health problem, especially in regions with tropical and subtropical climates. Bats have been reported as accidental hosts in the transmission cycle; however, there is no preceding information in Mexico. Therefore, the aim of the present study is to report the T. gondii infection in bats captured in sites of Campeche and Yucatan states, Mexico. Bats were captured in two sites in Yucatan (X'matkuil and Panaba) and one in Campeche (Hampolol), located in the Yucatan Peninsula. Kidneys, spleen, and liver were collected and used in the total DNA extraction. Toxoplasma gondii infection was detected through the amplification of a B1 gene fragment, using nested PCR. The positive PCR products were purified and sent to sequencing for a posterior sequence identity analysis. Additionally, a phylogenetic tree was made. A total of 69 bats belonging to eight different species were processed: 41 (59.4 %, 41/69) Artibeus jamaicensis; six (8.7 %, 6/69) Pteronotus parnellii; six (8.7 %, 6/69) Noctilio leporinus; six (8.7 %, 6/69) Chiroderma villosum; four (5.8 %, 4/69) Glossophaga soricina; two (2.9 %, 2/69) Carollia sowelli; two (2.89 %, 2/69) Artibeus lituratus; and two (2.9 %, 2/69) Rhogeessa aeneus. The nested PCR identified eight (11.6 %, 8/69) infected bats: six (75 %, 6/8) A. jamaicensis, captured in X'matkuil and Panaba, one (12.5 %, 1/8) G. soricina, and one (12.5 %, 1/8) C. villosum, both captured in Panaba. The alignment analysis yielded 99-100 % for cover and 97-99 % for identity to T. gondii sequences. Our results contribute to the understanding of the T. gondii transmission cycle in the region; however, future research is needed to determine circulating genotypes, as previous studies have demonstrated that these animals might be infected with identified genotypes in other domestic or wild animals and even in humans.